人类辅助生殖技术

　　1.体外受精-胚胎移植(IVF-ET)

　　该技术是将从母体取出的卵子置于培养皿内，加入经优选诱导获能处理的精子，使精卵在体外受精，并发育成前期胚胎后移植回母体子宫内，经妊娠后分娩婴儿。由于胚胎最初2天在试管内发育，所以又叫人类辅助生殖技术。

　　（1）适应证：1)输卵管堵塞；2)子宫内膜异位伴盆腔内粘连或输卵管异常，使精子在盆腔内被巨嗜细胞吞噬；3)男性轻度少精、弱精症；4)免疫性不孕不育、抗精子抗体阳性；5)原因不明的不孕不育。

　　（2）控制性超排卵与卵泡监测：按自然周期取卵，一次周期只能得到一个卵。为了提高妊娠率，目前在IVF-ET技术中，多采用控制性超排卵法，即选用人类促性腺激素，增强与改善卵巢功能，使一次周期能有多个卵泡发育，回收多个卵供受精，以获得较多供移植的胚胎。但超促排卵法有时会有卵泡早熟、质量差的情况。在实施促超排卵过程中，须用阴道B超扫描监测卵泡发育数目、大小，同时监测尿LH及血内激素变化，以便适时调整用药、正确估算取卵时间，并尽量使黄体与内膜功能、妊娠发生及妊娠维持相适应。

　　（3）取卵：B超引导下经阴道穿刺取卵术，此操作获卵率高，且此法不需麻醉切口，也不经过膀胱，避免了尿液对精子的伤害。我院专门为患者提供无痛麻醉下取卵术，可减轻患者痛苦。

　　（4）体外受精：将取到的卵泡液注入培养皿，肉眼快速辨认含卵细胞及其外周的透明带、放射冠的卵冠丘复合物。在解剖镜下确认有卵细胞存在后，置入CO2培养箱培养4-8h，再根据复合物的形态变化判断选择成熟卵细胞，按比例投入经过洗涤优选已诱导获能的精子，授精后16-18h观察情况，将受精卵移入培养试管/皿内培养。

　　（5）胚胎移植：于取卵后48h，胚胎发育成2-8个细胞阶段或在取卵后72h胚胎发育至8-16个细胞时植入子宫。后者较符合自然受精胚胎进入子宫的时间，且在传统体外培养条件下，只有最健康的胚胎才能活到3天，故移植成功率高。一次移植的胚胎数以1-2枚为宜。因为增加胚胎移植数，妊娠率虽呈不按比例的增加，但多胎率也会随之增加。

　　（6）胚胎冻融：在IVF-ET中由于促超排卵的应用，一个周期回收的卵泡，经受精发育的胚胎，移植后剩余的胚胎也需要冷冻储存，如移植失败，就可在下个自然周期或HRT周期移植，以提高一次取卵的妊娠率。另外遇到患者因促超排卵引发的卵巢刺激综合征，为了防止妊娠加重病情，也可将胚胎冻存，留待以后移植用。胚胎冻存的机制是，超低温可抑制细胞的新陈代谢，使生命进入休眠状态而保存下来。保存温度为-196℃，保存装置为以液氮作致冷源的液氮罐。

　　（7）胚胎移植后监测移植后12-14天验HCG阳性为生化妊娠，显示胚胎植入和发育正常。移植4-6周B超查到胎囊、胚胎为临床妊娠。

　　（8）IVF合并症：主要有流产、宫外孕、多胎妊娠、卵巢过度刺激综合征(OHSS)等。

　　2.卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)

　　这一技术是在针对男性精子数量不足，功能异常导致受精障碍所采取的体外受精的微滴法、透明带部分切除法及透明带下授精等方法基础上发展起来的。该技术又称第二代试管婴儿，其操作方法是，不用进行精子的诱导获能处理，只须选择一个形态正常，缓慢运动的精子先予以制动。方法用注射针挤压精子尾部，稍微擦破细胞质膜，诱导精子从擦破点释放精子细胞质体因子激活卵细胞，卵细胞的激活对ICSI的正常受精至关重要，接着按尾先头后的顺序吸精子放入注射针，再通过显微操作，将精子注入卵胞浆内，即完成受精。其他技术环节同于常规IVF-ET。对精道不通的患者可进行附睾穿刺，如吸出物中无精子，则从睾丸取活组织分离精子，或取精细胞激活后使用。适应证为:严重少、弱畸精症、输精管阻塞、先天性双侧输精管缺如以及输精管结扎后子女伤亡，吻合输精管失败或无法吻合者。ICSI是治疗男性不育的有效方法，但目前研究揭示，严重少、弱精症是由染色体镶嵌型异常引起，先天性双侧输精管缺如则常与囊性纤维膜传导基因突变有关，两者都是遗传病，对这两种患者治疗前应告知遗传风险，妊娠后需进行详细产前诊断，有异常须终止妊娠，或在胚胎移植前进行遗传学诊断(PGD)，筛选优质胚胎移植。